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电镜配套冷冻传输系统,鲜活样品直接冷冻条件下切片检测,生物扫描电镜主要利用二次电子成像拍摄材料的表面三维形貌情况,一般用来观察细胞外表面的变形以及受损情况等,也可以观察材料在细胞表面的分布情况,广泛应用于检测生物样品、非均相有机材料、无机材料等微米、纳米范围内的表面特征。

设备一:

名称:生物透射电镜

制造厂家:JEOL公司

型号:JEM-1400Flash

技术参数:

1.TEM分辨率 (nm):0.2 

2.加速电压:10 ~ 120kV

3.倍率 (TEM):×10~1,200,000 

4.样品倾斜角*1:Tilt-X  ±70°(高倾斜样品杆)

rich/1601197235.png

设备二:

名称:生物钨灯丝扫描电镜

制造厂家:HTACHI公司

型号: S-3000N 

技术参数:

1.点分辨率:6nm

2.最大放大倍数:20万倍

3.最大加速电压:30KV

rich/1601197449.png

设备三:

名称:生物冷场发射扫描电镜

制造厂家:HTACHI公司

型号:REGULUS8220

技术参数:

1.二次电子分辨率:0.7 nm(加速电压 15 kV);0.9 nm(着陆电压 1 kV)*2

2.加速电压:0.5~30 kV

3.着陆电压:0.01~20 kV

4.倍率:20~2,000,000倍*3

5.马达台控制 5轴自动

电镜配套冷冻传输系统,鲜活样品直接冷冻条件下切片检测

rich/1601197774.png


1、如果需要研究样品的内部结构,例如细胞器的改,则应选择透射电镜观察

2、如果需要研究样品表面的形态结构,如细胞的外形、细胞的生长形态等,则应选择扫描电镜观察


1、透射电镜样品:

1) “快速”:指尽量在活体条件下取材或动物断血后2分钟内取材,并迅速将组织放入电镜专用3.5%戊二醛固定液内(不可用酒精或消毒级戊二醛固定),并于4℃冰箱内保存,切忌样品结冰。

2) “准确”:指取材部位要准确。取材的器械要锋利,尽量减少对组织的牵拉和挤压。

3) “体积小、低温”:指组织厚度不应大于3mm,取材温度最好控制在4℃左右进行操作。

2、扫描电镜样品

1) 取材时还应尽量保护观察面,避免用镊子夹持观察区域,在固定前,通常应用适当的清洗液清洗样品表面的杂质,灰尘,粘液等附着物。

2) 常用的清洗波有蒸馏水、生理盐水、各种缓冲液或含酶的清洗液。

3) 样品取好后,放入3.5%戊二醛固定液内固定,保存在4℃冰箱中,切忌样品结冰。


1、透射电镜

取样——3.5%戊二醛前固定;1%鐵酸后固定——酒精、丙酮逐级梯度脱水——Epon-618渗透、包理——半薄切片——光镜选区定位——修块——超薄切片机切片——柠檬酸铅、醋酸铀双染色——透射电镜观察——摄片——分析+报告

2、扫描电镜样品

1) 取材——清洗——固定——冷冻——SEM观察(冷冻电镜)

2) 取材——清洗——固定——脱水——干燥——镀膜——SEM观察(常规检测)

3) 取材——清洗——固定——组织导电处理——脱水——SEM观察(特殊样品,例如外泌体)