生物电镜样品制备及表征服务

电镜是生物学中，观察组织、细胞、细菌等生物样本的有力工具，大多数生物样品水分较大，较柔软，易被破坏，不能直接用SEM、或者TEM下观察。一般需要经过取材、固定、组织导电染色、脱水、干燥镀膜等操作在能在SEM，或者经过超薄切片后在TEM下观察，不仅方法繁琐并且细胞结构容易受到影响。

设备一
设备二

设备名称：生物样品制备服务

型号：莱卡Lecia UCT&EM FCS&TRIMEM

技术指标：

1.切片厚度：lnm—15Um

2.落射光,背景光,透射光照明

3.显微镜放大10X-60X

配置情况：

常温超薄切片

低温冷冻超薄切片

修块机、制刀机等

擅长样品：

生物医学样品（如：动植物组织、细胞、临床手术样品）及部分材料

本模块为生物电镜样品制备，包括环境扫描及透射电镜样品制备，包含了常温、低温冷冻超薄切片机、树脂包埋修块机、制刀机等相关设备，同时还具有样品染色能力。可以完成：

（1）常温下将样品切成50-80纳米级超薄切片，以适用于透射电镜样品观察；

（2）在冷冻状态下对不需要强固定的新鲜组织样品及部分软组织材料进行超薄切片；

（3）将树脂包埋样品外多余树脂切除，暴露样品，并修整成特定的型态为后续切片做准备；

（4）制备适合半薄切片及超薄切片使用的玻璃刀

设备名称：电镜制样设备

仪器名称	型号	主要性能指标	测试对象	主要功能
常规超薄切片机	LEICA UCT	切片厚度：lnm—15Um 落射光,背景光,透射光照明控制面板遥控操作,并显示各种参数显微镜放大10X-60X	生物医学样品（如：动植物组织、细胞、临床手术样品）及部分材料	常温下将样品切成50-80纳米级超薄切片，以适用于透射电镜样品观察。
冷冻超薄切片机	LEICA-EM FCS	用于：新鲜的组织、细胞样品在低温冷冻状态下切成纳米级薄切片，使其保存组织、细胞免疫活性的样品制备一些难以使用树脂包埋样品制备超薄切片的软组织材料样品	新鲜生物样品及部分软材料	在冷冻状态下对不需要强固定的新鲜组织样品及部分软组织材料进行超薄切片
修块机	LEICA EM TRIM	用于树脂包埋的样品块进行显微镜下的切削	树脂包埋样品	将树脂包埋样品外多余树脂切除，暴露出样品，并修整成特定的型态为后续切片做准备
制刀机		可将玻璃条制备成一定角度的玻璃刀	特制玻璃条	制备适合半薄切片及超薄切片使用的玻璃刀

设备一
设备二

设备名称：透射电镜表征：LaB6透射电镜 Tecnai G2 Spirit TWIN

型号：FEI Tecnai G2 Spirit TWIN

技术指标：

1.TEM线分辨率：0.20 nm

2.TEM点分辨率：0.34 nm

3.加速电压20, 40, 60, 80, 100, 120 kV

4.放大倍数：18～650,000

5.具备能谱仪系统

6.具备CCD相机

配置情况：

1.EDS能谱仪系统

2.CCD成像系统

擅长样品：

生物样品、纳米粉末、球差电镜的筛样

Tecnai G2 Spirit TWIN适用于材料的形貌、成分表征分析，其带有电子衍射分析，且可以进行冷冻样品分析，可用于材料、化学化工、半导体、地质学、生物学、物理学等领域。

设备名称：环境场发射扫描电镜Quanta FEG250

型号：Quanta FEG250

技术指标：

1.分辨率：二次电子图像：高真空模式1.0 nm @ 30 kV，3.0 nm @ 1 kV 背散射电子像：高真空模式2.5 nm @ 30 kV，低真空及环境真空模式1.4 nm @ 30 kV

2.加速电压范围为200 V ～30 kV，束流范围为0.8 pA ～100 nA（15kV）、0.8 pA ～100 nA（2 kV）、0.8 pA ～100 nA（1 kV）

3.可通气体为水蒸气

擅长服务：

无机、金属、半导体、矿物及生物、植物样品

Quanta FEG250型环境场发射扫描电镜除了包含普通扫描电镜的全部测试外，还可以以水蒸气为气氛针对生物样品进行分析（细胞结构）

测试项目	内容	价格	备注	优惠信息
环境扫描电镜	包含普通扫描电镜的全部测试外，还可以以水蒸气为气氛针对生物样品进行分析（细胞结构）	800元/小时	Quanta FEG250	最高优惠至500/h
生物样品透射电镜	于材料的形貌、成分表征分析，其带有电子衍射分析	800元/小时	Tecnai G20	最高优惠至500/h
生物透射样品制备	包含整个生物样品制备过程	1000元/样品	如需样品盒150元/个	最高优惠至800/pcs
冷冻超薄切片透射样制备	新鲜生物样品及部分软材料	2500元/样品	特殊样品价格面议	最高优惠至2000/pcs
常规树脂包埋块	用于树脂包埋的样品块进行显微镜下的切削	500/样品	其他	无
修块+半薄定位	用于树脂包埋的样品块进行显微镜下的切削	200/样品	其他	无
超薄切片	生物医学样品（如：动植物组织、细胞、临床手术样品）及部分材料	500/样品	其他	无
超薄切片双染色	生物医学样品（如：动植物组织、细胞、临床手术样品）及部分材料	200/样品	其他	无
半薄切片+甲苯胺蓝染色	生物医学样品（如：动植物组织、细胞、临床手术样品）及部分材料	500/样品	其他	无
铜网	透射电镜样品承载网	20/个	其他	无
切片盒	电镜样品承载盒	30/个	其他	无
树脂	用于树脂包埋样品耗材	10/块	其他	无

1.取材：

是电镜样品制备的第一步，也是十分重要的一步。其操作成功与否直接关系到整个实验的成败。

A.快--就是指在血液未停止流动（未凝血）前取材。因为一旦组织失去血流供应，细胞就处在缺氧状态，代谢发生改变，细胞内的一些酶将释放出来使细胞自溶，破坏超微结构形态。所以当组织离体后应即刻予以固定。从断血到进入固定液尽量要求一分钟内完成。

B.小--由于受电镜固定液及包埋剂渗透速度的影响，因此，一般不允许组织块的大小超过1mm³ （1mm×1mm×1mm )。取材时动作要轻，刀锋要利，切组织时刀片沿着一个方向切，避免任何牵拉和挤压造成的机械损伤。
样品有特殊方向定位要求时，样品可按照1mm×1mm×2mm大小取材，并在送检表中注明切面方向。其他情况均不可超过1mm³大小。

C.准--为避免电镜观察样品视野小固有的局限性，要求在取材时选择部位准确可靠，即取材的组织小块必须为要求观察的部位.

D.净--尽量少带血液和组织液进入固定液。但切忌用水直接冲洗，可用缓冲液（0.1M PBS）或等渗盐水（0.9%NS）把表面的血液和组织液轻轻冲掉。

2.初固定并送检：

将取材样品快速放入事先由检测方配置好的固定液中（1.5ML尖底离心管内），于室温下放置30分钟后，转入4度保存。并尽量于24小时内送达检测方。送检运输时切忌置于冰盒内，常温下即可。

3.其他注意事项：

生物、医学样品及携带生物、医学样品的材料均需要送检人严格按照送检要求，准确取材快速固定。如因送检方未按照取材、初固定送检要求而导致电镜观察结果不理想的情况，检测方概不负责。

低熔点、易分解、磁性、毒性、挥发性、放射性的样品，请勿使用。

4.耗材